流行性脑膜炎抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
使 用 说 明(96T)
[原理]
作者 : 江彬
连系 ： （1991-4747-194）
本试剂盒采用亲和素-生物素化ECM-A纯化抗原预包被板ELISA 原理，检测人血清/血浆中存在的流脑A群IgG抗体，并配以酶标记抗人IgG单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应，在450nm波长测各孔O.D值，O.D值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统（biotin-avidin system）的稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高。
[用途]
本试剂盒用于定性检测人血清/血浆、脑积液中的脑膜炎球菌A群IgG型抗体，适用于流脑A群既往感染的诊断和流行病学调查及疫苗效果监测。
[适应范围]
流脑感染的流行病学调查及疫苗监测；流脑多在冬春季节发病，儿童多见。
[试剂盒组成]
1、生物素化ECM-A抗原预包被板 1块（8X12） 2、阴性对照 1瓶（直接使用）
3、阳性对照 1瓶（直接使用）
4、标本稀释液 1瓶（直接使用）
5、酶结合物 1瓶（直接使用）
6、30X浓缩洗液
1瓶（20ml，加蒸馏水1：30稀释使用）
7、显示剂A、B液 各1瓶（5ml）
8、终止液（2M H2SO4） 1瓶（5ml）
9、说明书 1份
[操作步骤]
1、试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板架上。
2、样本稀释：用标本稀释液以1：4（25ul血清加入75ul的标本稀释液）稀释血清标本于反应板孔中，设阴、阳性对照（各100ul）及空白对照（加100ul标本稀释液）各一孔，轻拍混匀。
3、37℃温育30分钟。甩去孔内液体，用洗涤液洗板3次并在吸水纸上拍干。
4、加酶结合物：每孔2滴，混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。
5、显色：每孔加显色剂A、B各一滴，轻拍混匀（或震荡器混匀）后置37℃10分钟。
[结果判断]
1．目测：在白色背景下观察各孔显色情况，兰色者为阳性，无色者为阴性。
2． 酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在450nm下测定各孔O.D值。
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- P/N=标本O.D值/阴性对照O.D值。
- P/N≥2.1为阳性；
- P/N＜2.1为阴性
- 阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计算, 大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算 ;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。
- 阳性对照（PC）值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。
[注意事项]
1、微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置2-8℃。
2、滴加试剂前应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。
3、洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。
4、试剂置2-8℃存放，不能冻结，有效期10个月。
5、避免用溶血、混浊或脂血标本。
6、最好用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周（样本应避光）。